褪黑素检测:如何科学准确地评估褪黑素含量
概括
褪黑素(Melatonin)是一种由松果体分泌的激素,广泛应用于改善睡眠质量、调节生物钟等方面。随着健康意识的提高,市场上关于褪黑素的保健品和补充剂种类繁多,因此,科学严谨地检测褪黑素的含量显得尤为重要。本文将详细介绍褪黑素的检测方法,如何选择适合的检测样品,检测项目的设置、检测仪器的使用,以及最终的检测过程。
检测样品
褪黑素检测的样品通常包括血液、尿液以及褪黑素补充剂的样品。血液样本是最常见的检测来源,因为它直接反映了体内褪黑素的水平,能够更准确地评估个体的激素分泌情况。尿液样本则可以用来检测代谢产物,反映体内褪黑素的排泄情况。褪黑素补充剂样品则用于检测市场上售卖的补充品中的褪黑素含量,以确保其质量与标签一致。
检测项目
在褪黑素的检测过程中,主要的检测项目包括但不限于:
- 褪黑素浓度:检测血液或尿液中褪黑素的实际浓度,通常以皮摩尔/升(pmol/L)为单位。
- 褪黑素的代谢物:包括6-硫代褪黑素等代谢物的检测,反映了褪黑素的代谢和清除速率。
- 剂量与补充效果:通过评估补充褪黑素后,体内激素水平的变化来检测补充效果。
检测仪器
褪黑素检测通常使用的仪器有:
- 高效液相色谱(HPLC):这是一种常用的检测方法,可以准确分离并定量血液或尿液中的褪黑素及其代谢产物。HPLC的高灵敏度和高分辨率使其成为最常用的检测工具。
- 酶联免疫吸附法(ELISA):这种方法通过抗原抗体反应来检测褪黑素的含量,广泛应用于较为简便的检测。
- 质谱法(MS):质谱法可以精准分析血液或尿液中微量的褪黑素,尤其适用于复杂样品中微量激素的检测。
检测方法
褪黑素检测的常见方法包括:
- 血液检测:将采集到的血液样本进行离心处理,提取血浆后使用HPLC或ELISA法进行检测。
- 尿液检测:收集一定量的尿液样本,经过处理后同样使用HPLC或质谱法进行分析。
- 补充剂检测:将褪黑素补充剂溶解或溶解后,通过HPLC对样本中的褪黑素进行定量分析,确保产品的真实成分。
检测标准(部分)
《 T/NAIA 0346-2024 葡萄酒中褪黑素及其代谢物2-羟基褪黑素、6-羟基褪黑素的测定 高效液相色谱-串联质谱法 》标准简介
- 标准名称:葡萄酒中褪黑素及其代谢物2-羟基褪黑素、6-羟基褪黑素的测定 高效液相色谱-串联质谱法
- 标准号:T/NAIA 0346-2024
- 中国标准分类号:C151
- 发布日期:2024-12-03
- 国际标准分类号:67.160.01
- 实施日期:2024-12-15
- 团体名称:宁夏化学分析测试协会
- 标准分类:食品技术C 制造业
- 内容简介:
本文件规定了葡萄酒中褪黑素及其代谢物2-羟基褪黑素、6-羟基褪黑素的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本文件适用于葡萄酒中褪黑素及其代谢物2-羟基褪黑素、6-羟基褪黑素的测定和确证。
《 T/BDAS 001-2023 牛奶中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法 》标准简介
- 标准名称:牛奶中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法
- 标准号:T/BDAS 001-2023
- 中国标准分类号:X04/M745
- 发布日期:2023-03-14
- 国际标准分类号:67.100.10
- 实施日期:2023-03-20
- 团体名称:北京市奶业协会
- 标准分类:M 科学研究和技术服务业食品技术
- 内容简介:
本文件描述了牛奶中褪黑素含量测定的液相色谱-串联质谱法本文件适用于生牛乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳中褪黑素的测定本文件中褪黑素的检出限为0.01μg/L,定量限为0.05μg/L主要技术变化如下:a)更改了检出限和定量限(见第1章,2021年版的第1章)
b)更改了原理中的定量方法(见第4章,2021年版的第4章)
c)增加了甲醇水溶液(2%)、褪黑素标准中间液Ⅰ、褪黑素标准中间液Ⅱ、氘代褪黑素标准品、氘代褪黑素标准工作溶液和HLB(亲水/油平衡)固相萃取柱、增加了标准曲线1μg/L和2μg/L两个浓度、删除了0.02μg/L浓度(见第5章,2021年版的第5章)
d)增加了氮吹仪,删除了移液管(见第6章,2021年版的第6章)
e)增加了净化步骤(见8.3,2021年版的8.2)
f)增加了氘代褪黑素定量离子对(见8.4.2,2021年版的8.4)
g)更改了定量中标准曲线的制备(见8.4.4,2021年版的8.3)
h)更改了试验数据处理(见第9章,2021年版的第9章)
《 T/BDAS 002-2023 血清中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法 》标准简介
- 标准名称:血清中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法
- 标准号:T/BDAS 002-2023
- 中国标准分类号:C04/M745
- 发布日期:2023-03-14
- 国际标准分类号:11.020
- 实施日期:2023-04-13
- 团体名称:北京市奶业协会
- 标准分类:C 制造业医药卫生技术
- 内容简介:
本文件描述了血清中褪黑素含量测定的液相色谱-串联质谱法本文件适用于血清中褪黑素的测定本文件检测方法的检出限为0.01μg/L,定量限为0.05μg/L本标准描述了血清中褪黑素含量测定的液相色谱-串联质谱法,适用于血清中褪黑素的测定
提取方式:准确移取1mL试样置于15mL离心管中,加入氘代褪黑素标准工作液50μL,加入4mL甲醇,使用旋涡混合仪振荡提取5min
使用低温高速离心机以10000g、4℃离心5min
取上清液,过0.22μm滤膜,供液相色谱-串联质谱测定
技术要点1:甲醇作为褪黑素溶剂,不但不会影响样品中目标物质的稳定性,还可以使得血清中蛋白变性沉淀,实验操作简便,其回收率能达到60%以上,能够很好满足血清中褪黑素检测要求
技术要点2:血清中的褪黑素用甲醇提取后,用液相色谱-串联质谱仪测定,内标法定量
本标准中规定了褪黑素的检出限为0.01μg/L,定量限为0.05μg/L;本标准方法的褪黑素回收率为:60~120%,依据GB/T?27404符合在一定浓度水平的回收率范围;相对偏差(RSD)≤20%
《 T/BDAS 001-2021 牛奶中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法 》标准简介
- 标准名称:牛奶中褪黑素含量的测定 液相色谱-串联质谱法
- 标准号:T/BDAS 001-2021
- 中国标准分类号:X04/M745
- 发布日期:2021-08-11
- 国际标准分类号:67.100.10
- 实施日期:2021-09-10
- 团体名称:北京市奶业协会
- 标准分类:M 科学研究和技术服务业食品技术
- 内容简介:
本文件规定了牛奶中褪黑素含量的液相色谱-串联质谱测定方法本文件适用于生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳中褪黑素的测定本文件检测方法的检出限为0.04μg/L,定量限为0.10μg/L本标准规定牛奶中褪黑素含量的测定液相色谱-串联质谱法,适用于生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳中褪黑素含量的测定
提取方式:取适量样品置于超声波清洗机,37℃超声30min,使样品充分混匀
准确移取1mL试样置于15mL离心管中,准确加入4mL甲醇,使用旋涡混合仪振荡提取10min,-18℃静置30min
使用低温高速离心机以10000g、4℃离心5min,上清液过0.22μm有机相滤膜过滤至样品瓶,获得试样溶液,供液相色谱-串联质谱测定
技术要点1:甲醇作为褪黑素溶剂,不但不会影响样品中目标物质的稳定性,还可以使得牛奶中蛋白变性沉淀
将待测样品和甲醇采用1:4混合,使用甲醇溶剂一步萃取法,无需净化,减少除脂过程造成的损失
技术要点2:牛奶及其奶制品中含有大量粒度大小不等的脂肪球,超声波(30min)在液体中能产生空化作用,击碎牛奶中的脂肪球
旋涡混合仪振荡提取10min,可以离心得到上机液,不损失褪黑素
技术要点3:牛奶中的褪黑素用甲醇提取后,用液相色谱-串联质谱仪测定,基质匹配外标法定量
本标准中规定了褪黑素的检出限为0.04μg/L,定量限为0.10μg/L;本标准方法的褪黑素回收率为:60~120%,依据GB/T27404符合在一定浓度水平的回收率范围;相对偏差(RSD)≤20%
《 GB/T 5009.170-2003 保健食品中褪黑素含量的测定 》标准简介
- 标准名称:保健食品中褪黑素含量的测定
- 标准号:GB/T 5009.170-2003
- 中国标准分类号:C53
- 发布日期:2003-08-11
- 国际标准分类号:67.040
- 实施日期:2004-01-01
- 技术归口:全国特殊食品标准化技术委员会
- 代替标准:
- 主管部门:国家市场监督管理总局(特殊食品司)
- 标准分类:食品技术食品综合
- 内容简介:
国家标准《保健食品中褪黑素含量的测定》由TC466(全国特殊食品标准化技术委员会)归口,主管部门为国家市场监督管理总局(特殊食品司)。
本标准规定了以褪黑素为有效成分的胶囊或片剂包装的保健食品中褪黑素的测定方法。 本标准适用于以褪黑素为有效成分的胶囊或片剂包装的保健食品中褪黑素的测定。 本标准第一法高效液相色谱-紫外检测法的检出限为0.5ng;取样量0.5g时,检出浓度为0.07mg/kg。第二法高效液相色谱-荧光法的检出限为30pg,线性范围为0.05ng~0.50ng。
暂无更多检测标准,请联系在线工程师。
结语
褪黑素作为一种重要的生物激素,越来越受到大众的关注。为了确保褪黑素的有效性与安全性,进行科学严谨的检测至关重要。从样品选择、检测项目、仪器到方法的合理应用,每一环节都需要精确控制,以确保检测结果的可靠性与准确性。无论是临床检测还是产品质量把控,准确的褪黑素检测都有助于为公众健康提供有力保障。
结语
以上是关于褪黑素检测:如何科学准确地评估褪黑素含量的介绍,如有其它问题请 联系在线工程师 。