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检测样品
酶联免疫检测可以应用于各种样品类型,包括血清、血浆、尿液、唾液、组织培养液等生物样品,甚至是食品、环境样品等。常见的应用如血清中的特异性抗体、抗原的检测。尤其是在疾病筛查中,ELISA能够对多种病原体的抗体或抗原进行灵敏检测,从而帮助医生或研究人员做出诊断和决策。
检测项目
酶联免疫检测的项目涵盖了广泛的领域,常见的包括:
- 病原体抗体或抗原检测:如乙肝、艾滋病、流感等传染性疾病的检测。
- 激素水平测定:如甲状腺激素、胰岛素、雌激素等生物标志物的检测。
- 过敏源检测:通过检测IgE抗体,评估过敏源对个体的影响。
- 免疫监测:用于评估免疫功能,如检测细胞因子、免疫抑制因子等。
这些检测项目不仅帮助临床医生进行精准诊断,还在生物研究和疫苗开发中发挥着至关重要的作用。
检测仪器
酶联免疫检测的仪器设备主要包括微孔板酶标仪(Microplate Reader)和酶标分析仪(Enzyme Immunoassay Analyzer)。这些仪器能够通过检测酶反应后的颜色变化,快速、准确地读取结果。具体来说,微孔板酶标仪能够在96孔或384孔的反应板上,读取样品中颜色变化的吸光度,进而计算出样品的浓度或反应强度。
仪器的精准度和灵敏度是影响ELISA实验结果准确性的关键因素,因此设备的校准与维护至关重要。此外,某些实验还需要配备分光光度计,以精确测定样品的吸光度。
检测方法
酶联免疫检测方法的基本原理是基于抗原-抗体反应。在ELISA检测过程中,通常使用以下几种检测方法:
- 直接ELISA:直接将抗原或抗体固定在固相载体(如微孔板)上,通过酶标记的抗体或抗原进行检测。
- 间接ELISA:先固定抗原或抗体,然后使用标记抗体与目标抗体结合,最终通过酶的催化反应产生可测量的信号。
- 竞争ELISA:适用于检测小分子抗原或抗体,原理是抗原与标记抗原竞争结合到抗体上,抑制酶的反应,结果与目标物质浓度成反比。
- 夹心ELISA:用于检测复杂的抗原,通过双抗体系统(捕获抗体和检测抗体)夹持目标抗原,形成强烈的信号。
这些方法各有优缺点,选择合适的ELISA类型取决于样品的性质、检测的目标及灵敏度要求。
检测标准(部分)
《 T/GXTC 0011-2024 基于酶联免疫法(ELISA)甘蔗宿根性早期评价 》标准简介
- 标准名称:基于酶联免疫法(ELISA)甘蔗宿根性早期评价
- 标准号:T/GXTC 0011-2024
- 中国标准分类号:B05/A013
- 发布日期:2024-07-24
- 国际标准分类号:65.020.20
- 实施日期:2024-08-05
- 团体名称:广西热带作物学会
- 标准分类:农业A 农、林、牧、渔业
- 内容简介:
本文件规范了基于酶联免疫法(ELISA)甘蔗宿根性早期评价的术语和定义、原理、材料和试剂、仪器设备、检测步骤和数据处理。本文件适用于甘蔗组培苗、种苗、种茎及大田植株的宿根蔗宿根性的早期评价。
《 T/DACS 009-2023 牛奶中四环素类药物残留的快速检测方法 酶联免疫方法 》标准简介
- 标准名称:牛奶中四环素类药物残留的快速检测方法 酶联免疫方法
- 标准号:T/DACS 009-2023
- 中国标准分类号:B60/A031
- 发布日期:2023-06-16
- 国际标准分类号:67.260
- 实施日期:2023-06-16
- 团体名称:中国奶业协会
- 标准分类:食品技术A 农、林、牧、渔业
- 内容简介:
本文件描述了牛奶中四环素、金霉素、土霉素及多西环素残留的酶联免疫测定方法
本文件适用于牛奶中四环素、金霉素、土霉素及多西环素残留的测定
本文件的方法检出限:四环素类药物为2μg/kg
将样品/试样稀释制成试样溶液,试样溶液中残留的四环素类药物与酶标板上的抗原共同竞争四环素类药物抗体,在酶标记物的作用下,形成酶标记抗原抗体复合物与显色剂发生反应转化为有色底物,用酶标仪测定吸光度值,根据吸光度值得出试样中四环素类药物的含量。
《 SN/T 4479-2016 出口原奶和奶粉中三聚氰胺的检测方法 酶联免疫吸附法和胶体金法 》标准简介
- 标准名称:出口原奶和奶粉中三聚氰胺的检测方法 酶联免疫吸附法和胶体金法
- 标准号:SN/T 4479-2016
- 中国标准分类号:
- 发布日期:2016-03-09
- 国际标准分类号:67.040
- 实施日期:2016-10-01
- 技术归口:
- 代替标准:
- 主管部门:
- 标准分类:食品技术SN 出入境检验检疫
- 内容简介:
《 DB34/T 821-2024 动物组织中氯霉素的残留测定-酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:动物组织中氯霉素的残留测定-酶联免疫吸附法
- 标准号:DB34/T 821-2024
- 中国标准分类号:X00
- 发布日期:2024-04-15
- 国际标准分类号:67.120
- 实施日期:2024-05-15
- 技术归口:安徽省农业农村厅
- 代替标准:
- 主管部门:安徽省市场监督管理局
- 标准分类:食品技术肉、肉制品和其他动物类食品农、林、牧、渔业安徽省
- 内容简介:
地方标准《动物组织中氯霉素的残留测定-酶联免疫吸附法》,主管部门为安徽省市场监督管理局。本文件规定了畜禽肌肉、肝脏、肾脏、尿液及禽蛋、鱼肉、虾肉中氯霉素残留量的酶联免疫吸附测定方法。本文件适用于畜禽肌肉、肝脏、肾脏、尿液及禽蛋、鱼肉、虾肉中氯霉素残留量的快速筛选测定。
《 DB45/T 2732-2023 猪链球菌2型抗体的检测 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:猪链球菌2型抗体的检测 酶联免疫吸附法
- 标准号:DB45/T 2732-2023
- 中国标准分类号:B41
- 发布日期:2023-08-10
- 国际标准分类号:11.220
- 实施日期:2023-09-30
- 技术归口:广西畜牧业标准化技术委员会
- 代替标准:
- 主管部门:广西壮族自治区市场监督管理局
- 标准分类:医药卫生技术兽医学农、林、牧、渔业广西壮族自治区
- 内容简介:
地方标准《猪链球菌2型抗体的检测 酶联免疫吸附法》由广西畜牧业标准化技术委员会归口上报,主管部门为广西壮族自治区市场监督管理局。本文件规定了猪链球菌2型抗体的酶联免疫吸附法检测的原理、试剂、器材、试验样品准备、操作方法、注意事项等要求。本文件适用于广西壮族自治区行政区域内猪链球菌2型抗体的检测和猪只接种猪链球菌2型疫苗后的免疫效果评价。
《 SB/T 10926-2012 动物组织中呋喃唑酮代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:动物组织中呋喃唑酮代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法
- 标准号:SB/T 10926-2012
- 中国标准分类号:B41
- 发布日期:2013-01-23
- 国际标准分类号:67.120.01
- 实施日期:2013-09-01
- 技术归口:商务部
- 代替标准:
- 主管部门:商务部
- 标准分类:食品技术肉、肉制品和其他动物类食品动物制品综合SB 国内贸易
- 内容简介:
行业标准《动物组织中呋喃唑酮代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法》由商务部归口上报,主管部门为商务部。
《 SB/T 10927-2012 动物组织中硝基呋喃类代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:动物组织中硝基呋喃类代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法
- 标准号:SB/T 10927-2012
- 中国标准分类号:B41
- 发布日期:2013-01-23
- 国际标准分类号:67.120.01
- 实施日期:2013-09-01
- 技术归口:商务部
- 代替标准:
- 主管部门:商务部
- 标准分类:食品技术肉、肉制品和其他动物类食品动物制品综合SB 国内贸易
- 内容简介:
行业标准《动物组织中硝基呋喃类代谢物残留的测定 酶联免疫吸附法》由商务部归口上报,主管部门为商务部。
《 T/SATA 070-2024 水中拟柱孢藻毒素的测定 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:水中拟柱孢藻毒素的测定 酶联免疫吸附法
- 标准号:T/SATA 070-2024
- 中国标准分类号:M731
- 发布日期:2024-04-17
- 国际标准分类号:13.060.01
- 实施日期:2024-05-17
- 团体名称:深圳市分析测试协会
- 标准分类:环保、保健和安全M 科学研究和技术服务业
- 内容简介:
本文件提供了测定水中拟柱孢藻毒素的酶联免疫吸附法。本文件适用于地表水中拟柱孢藻毒素的测定。
《 T/SHAAV 018-2024 犬瘟热病毒抗体检测 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:犬瘟热病毒抗体检测 酶联免疫吸附法
- 标准号:T/SHAAV 018-2024
- 中国标准分类号:M733
- 发布日期:2024-04-10
- 国际标准分类号:11.220
- 实施日期:2024-04-10
- 团体名称:上海市畜牧兽医学会
- 标准分类:医药卫生技术M 科学研究和技术服务业
- 内容简介:
1范围2规范性引用文件3术语和定义4缩略语5原理6试剂和材料7仪器设备添加规格8样品的采集与前处理9操作方法10结果判定
《 T/SHAAV 019-2024 犬细小病毒抗体检测 酶联免疫吸附法 》标准简介
- 标准名称:犬细小病毒抗体检测 酶联免疫吸附法
- 标准号:T/SHAAV 019-2024
- 中国标准分类号:M733
- 发布日期:2024-04-10
- 国际标准分类号:11.220
- 实施日期:2024-04-10
- 团体名称:上海市畜牧兽医学会
- 标准分类:医药卫生技术M 科学研究和技术服务业
- 内容简介:
1范围2规范性引用文件3术语和定义4缩略语5原理6试剂和材料7仪器设备添加规格8样品的采集与前处理9操作方法10结果判定
《 YY/T 1259-2015 戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法) 》标准简介
- 标准名称:戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)
- 标准号:YY/T 1259-2015
- 中国标准分类号:C44
- 发布日期:2015-03-02
- 国际标准分类号:11.100
- 实施日期:2016-01-01
- 技术归口:全国医用临床检验实验室、体外诊断系统标准化技术委员会
- 代替标准:
- 主管部门:国家药监局
- 标准分类:医药卫生技术YY 医药卫生和社会工作
- 内容简介:
行业标准《戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)》,主管部门为国家药监局。本标准规定了戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)的术语和定义、分类、要求、试验方法、标识、标签、使用说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于应用间接酶联免疫吸附法原理,利用戊型肝炎病毒(HEV)抗原包被微孔板和酶标记抗人IgG及其他试剂组成的试剂盒,用于检测人血清或血浆样品中戊型肝炎病毒IgG抗体。
《 YY/T 1260-2015 戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法) 》标准简介
- 标准名称:戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)
- 标准号:YY/T 1260-2015
- 中国标准分类号:C44
- 发布日期:2015-03-02
- 国际标准分类号:11.100
- 实施日期:2016-01-01
- 技术归口:全国医用临床检验实验室、体外诊断系统标准化技术委员会
- 代替标准:
- 主管部门:国家药监局
- 标准分类:医药卫生技术YY 医药卫生和社会工作
- 内容简介:
行业标准《戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)》,主管部门为国家药监局。本标准规定了戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)的术语和定义、分类、要求、试验方法、标识、标签、使用说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于应用捕获酶联免疫吸附法原理,利用抗人IgM(p链)单克隆抗体包被微孔板和酶标记戊型肝炎病毒(HEV)抗原及其他试剂组成的试剂盒,或间接酶联免疫吸附法原理,利用戊型肝炎病毒(HEV)抗原包被微孔板和酶标记抗人IgM及其他试剂组成的试剂盒,用于检测人血清或血浆样品中戊型肝炎病毒IgM抗体。
《 T/SHAAV 013-2023 猪粪中氧氟沙星残留量的测定-酶联免疫吸附法与液相色谱-串联质谱法 》标准简介
- 标准名称:猪粪中氧氟沙星残留量的测定-酶联免疫吸附法与液相色谱-串联质谱法
- 标准号:T/SHAAV 013-2023
- 中国标准分类号:A031
- 发布日期:2023-12-21
- 国际标准分类号:65.020.30
- 实施日期:2023-12-21
- 团体名称:上海市畜牧兽医学会
- 标准分类:农业A 农、林、牧、渔业
- 内容简介:
本文件描述了猪粪中氧氟沙星残留量的酶联免疫吸附和液相色谱-串联质谱测定方法
本文件适用于猪粪中氧氟沙星残留量的测定
1范围2规范性引用文件3术语和定义4样品5酶联免疫吸附法6液相色谱-串联质谱法
《 T/GZTPA 0001-2019 关于发布T/GZTPA 0001- 2019 《茶叶、蔬菜中克百威残留的测定酶联免疫吸附法》的公告 》标准简介
- 标准名称:关于发布T/GZTPA 0001- 2019 《茶叶、蔬菜中克百威残留的测定酶联免疫吸附法》的公告
- 标准号:T/GZTPA 0001-2019
- 中国标准分类号:A014
- 发布日期:2019-12-12
- 国际标准分类号:65.020.01
- 实施日期:2020-01-01
- 团体名称:贵州省绿茶品牌发展促进会
- 标准分类:A 农、林、牧、渔业
- 内容简介:
本标准规定了茶叶、蔬菜中克百威残留量的酶联免疫吸附测定法
本标准适用于茶叶、蔬菜中克百威残留量的测定
采用间接竞争酶联免疫吸附(ELISA)方法,在微孔条上包被偶联抗原,试样中残留的克百威与酶标板上的偶联抗原竞争克百威抗体,加入酶标记的抗体后,显色剂显色,终止液终止反应。用酶标仪在450nm处测定吸光度,吸光值与克百威残留量呈负相关,与标准曲线比较,再乘以其对应的稀释倍数,即可得出克百威残留含量。
《 T/NAASS 059-2023 牛呼吸道合胞体病毒病竞争性酶联免疫 吸附试验抗体检测技术规程 》标准简介
- 标准名称:牛呼吸道合胞体病毒病竞争性酶联免疫 吸附试验抗体检测技术规程
- 标准号:T/NAASS 059-2023
- 中国标准分类号:A031
- 发布日期:2023-03-22
- 国际标准分类号:65.020.30
- 实施日期:2023-04-25
- 团体名称:宁夏回族自治区农学会
- 标准分类:A 农、林、牧、渔业农业
- 内容简介:
本文件规定了牛呼吸道合胞体病毒病竞争性酶联免疫吸附试验抗体检测的术语和定义、竞争性酶联免疫吸附试验本文件适用于牛呼吸道合胞体病毒病竞争性酶联免疫吸附试验抗体检测3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件
牛呼吸道合胞体病毒Bovinerespiratorysyncytialvirus,BRSV牛呼吸道合胞体病毒是单股负链RNA病毒,属副粘病毒科、肺病毒属
感染奶牛和肉牛后可引起急性呼吸道疾病综合征
3.2竞争性酶联免疫吸附试验Competitiveenzymelinkedimmunosorbentassay,cELISA竞争性ELISA法是将已知的特异性抗原包被在固相载体上,加入待测样本和酶结合物,其中的相应抗体即可与载体上的抗原和酶结合物竞争结合,洗去未结合的材料和被竞争结合的酶结合物,加入酶的底物,由呈色反应来测定抗体
4 竞争性酶联免疫吸附试验试验准备实验环境、仪器与设备、洗液的制备、稀释液的制备、示踪剂工作液的配制按照试剂盒说明书规定执行
稀释用蒸馏水应符合GB/T6682的要求
检测样品无菌采集牛静脉血2mL~3mL,自然凝固1h~2h,1500rpm/min~2000rpm/min离心5min,收集血清于1.5mL离心管中
操作程序使用前将所有试剂(结合物除外)恢复至室温(20℃~25℃),轻轻摇动或旋转,使试剂混合均匀
4.3.1 取板取出微孔板,并在操作记录表上标记样品的位置
如果使用微孔板的一部分,则只需取出足够检测样品的条数
未使用的微孔板条用锡箔纸包好,保持干燥与密封,2℃~8℃保存
4.3.2 加样按照试剂盒说明书规定浓度,稀释血清样品,每孔加入待检样品,按照板孔布局加阴性和阳性对照
4.3.3 稀释酶结合物用稀释液将酶结合物稀释至所需要的量
4.3.4 加酶结合物每孔加入酶结合物,摇匀
4.3.5 感作将微孔板密封后,37oC孵育
4.3.6 洗板弃去微孔板中液体,用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔6次
在每一次洗涤后,甩去每个板孔中的液体,在洗涤时以及在加入下一步试剂之前要防止反应板出现干燥现象,避免孔内产生气泡,在最后一次甩掉后,在吸水材料上用力扣板,吸去剩余的液体.4.3.7 加底物每孔加入底物溶液
避光室温孵育
4.3.8 加终止液每孔加入终止液终止反应
4.3.9 测定吸光值(OD值)酶标仪预热15min,在加入终止液5min内读取波长的吸光度值
实验有效性检测只有当满足试剂盒说明书规定的条件时检测才有效
结果计算使用试剂盒说明书指定的计算公式进行结果计算
结果判定使用试剂盒说明书规定的判定标准进行结果判定
暂无更多检测标准,请联系在线工程师。
结语
酶联免疫检测作为一种高效、准确且灵敏的分析方法,已成为许多领域不可或缺的检测技术。无论是临床诊断、疫苗开发、疾病监测,还是食品安全检测,ELISA都展现了巨大的应用潜力。在未来,随着技术的不断进步,ELISA将更加精准、快捷,推动各类疾病的早期诊断和预防工作,也为生命科学研究提供更加可靠的数据支持。
结语
以上是关于酶联免疫检测:一项科学严谨的检测技术解析的介绍,如有其它问题请 联系在线工程师 。